细胞培养室是进行各种细胞培养的净化级实验室,所有进入细胞培养室的人员都必须遵守中心有关规章制度,接受实验室管理人员的管理。
一、总则
1. 使用细胞培养室前必须预先征得实验室负责人和管理人员同意。
2. 进出细胞培养室需要严格登记,如有不符合实验室工作和生物安全要求的,实验室负责人和管理人员有权暂停其使用权限。
3. 申请使用人员需参加细胞培养室使用规范培训并通过考核后,方可获准进入细胞培养室进行实验,严禁未经许可擅自进入细胞培养室或使用相关设备。
4. 细胞培养室正常使用过程中,人员进出应通过缓冲间和风淋室,实验所需器械和样品需通过传递窗传递进出,严禁随身携带,严禁将与实验无关的物品带入实验室,在细胞培养室内不得进行微生物等其它易污染物的培养,禁止从事任何高危生化实验。
5. 实验人员应爱护实验室各类仪器,按照规则使用并保持设备清洁,实验室精密仪器需经专门培训后方能操作,未经许可不得改变设备仪器的预设参数,设备仪器出现故障或发生事故,应及时向管理人员报告,管理人员应尽快安排专业人员进行检修。
二、常规操作
1. 实验人员进入细胞培养室前须在缓冲间内更换实验服和拖鞋。
2. 实验过程中严禁喧哗,闲聊,反复进出细胞培养室。
3. 从培养箱取放物品前,必须用75%酒精清洁双手(或手套),尽量缩短开门时间、减少开门次数。
4. 从培养箱拿取细胞时轻拿轻放,动作迅速,随手关紧培养箱门,未经允许,禁止翻看、移动他人细胞或样品。
5. 培养瓶、皿放入培养箱前,用75%酒精消毒表面,等酒精挥发后再放入,以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。
6. 培养箱内瓶、皿的放置需整洁有序,方便查找。
7. 实验人员进入细胞培养室后应注意检查培养箱温度、CO2气体量、增湿盘水位是否相符设定值,密切注意培养箱内情况,如出现明显染菌迹象,应立即通知管理人员。
8. 倒置显微镜使用前,应用75%酒精擦拭载物台,显微镜使用完毕后应及时关闭显微镜灯源、电源。
9. 超净台使用遵循预约原则,在细胞培养室入口处预约,细胞培养室内填写使用登记。
10.无预约者若有必要在他人预约时段内使用,需先征得预约者的同意。
11.超净台使用前应用紫外灯照射15分钟以上,使用前、后需用酒精棉球擦拭工作区消毒,所有物品放入超净台内使用前均应消毒,超净台内严禁堆放过多物品影响风路平衡,不同超净台内物品严禁频繁交换使用。
12.点燃酒精灯前需检查瓶中酒精是否足够,且液面不得高于瓶高的三分之二。
13.超净台中应摆放废液杯,用于暂时存放废弃物,实验结束后往杯内加入NaOH溶液处理片刻,废液垃圾倒入水池并同时用水冲释,固体垃圾倒入专用垃圾桶中。
14.从冰箱取放物品动作要迅速,关门时要检查门是否关好,按类别存放试剂。严禁长时间敞开冰箱门。
15.各人存放于冰箱内的培养液、生化试剂、样品要注明姓名、配制日期、样品名称,不得使用他人的培养液或其它生化试剂。
16.管理人员会定期对冰箱进行清理,发现无标记,违禁试剂等违规物品将全部清除。
三、人员培训
1. 细胞培养室管理人员视申请人数酌情安排培训时间,培训内容包括安全培训、理论知识与实践操作培训。
2. 培训考核合格后由中心负责人、管理人员签字确认授予其细胞培养室使用权限。
3. 考核不合格者重新参加培训。